凍干品Benzonase核酸酶

商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
凍干品Benzonase核酸酶	100KU	BJ-PJ6691

商品介紹：

描述：

Benzonase 核酸酶是來(lái)自 Serratia marcescens, 經(jīng)基因工程改進(jìn)的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式(包括單鏈，
雙鏈，線性和環(huán)狀)的 DNA 和 RNA 而沒(méi)有蛋白裂解活性，
在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸完全消化成3-5 堿基長(zhǎng)度（雜交限度以下）的 5’-單磷酸寡核苷酸，最適合從重級(jí)蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量的最佳選擇。
單位定義：在 30 分鐘內(nèi)使△ A260 值降低 1.0(相當(dāng)于完全消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。
注意：含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品，對(duì)該酶有部分抑制作用，使用時(shí)需要增加酶的用量。
應(yīng)用
蛋白提取時(shí)去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲(chǔ)存：本品為凍干品形式，在凍干品未溶解狀態(tài)下，可置于
-20°C 長(zhǎng)期保存，可以室溫保存 1 個(gè)月，因此可在室溫條件下運(yùn)輸。
溶解：本品可使用 400 μl 的 ddH2O 溶解，溶解后該酶的濃度為 250U/μl。使用 ddH2O 溶解后的制品可在-20°C 保存 3個(gè)月，長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-60°C 以下。本品亦可使用 400 μl 的20%甘油溶解，溶解后的制品可在-20°C 條件下保存 2 年。
操作方法
1. 組織處理方法：將 30-50mg 動(dòng)植物組織研磨充分后，加入 100-200 μl RIPA 裂解液(,C2501)，同時(shí)加入溶解后的 1 μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
2. 細(xì)胞處理方法：將 106-107 懸浮細(xì)胞液 6,000 rpm 離心10min 后，棄掉上清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細(xì)胞，同時(shí)加入溶解后的 1μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
注意：貼壁細(xì)胞重懸于 PBS 后，處理方法同懸浮細(xì)胞。
3. 大腸桿菌細(xì)胞處理：將 500 μl E.coli 培養(yǎng)液 8,000rpm 離心 5min 后，棄掉上清液，使用 100 μl 大腸桿菌裂解液(,C2301)重懸細(xì)胞，同時(shí)加入溶解后的 1μl
Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后，將裂解產(chǎn)物于 13,000 rpm 離心 10min后，取上清即為提取蛋白（包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白）。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒(,C3001)測(cè)定蛋白濃度。